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摘要
目的 对埃及伊蚊6个丝氨酸蛋白酶基因（clip-domain serine proteases,CLIPs）进行系统分析，为埃及伊蚊先天免疫功能的研究提供理论基础。方法 利用生物信息学研究方法，使用在线软件Clustal Omega分析CLIPs在物种间的相似性，利用在线工具SOPMA对其二级结构进行预测，利用MEGA 7.0软件构建系统进化树；通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法研究6个CLIPs在埃及伊蚊从卵到成虫的发育时期及未吸血雌蚊不同组织中的表达情况；通过细菌侵染雌性成蚊，研究CLIPs对不同细菌感染时的诱导动力学。采用单因素方差分析对实验结果进行比较。结果 从国家生物技术信息中心的GeneBank数据库中得到埃及伊蚊6个CLIPs，通过生物信息学分析，发现其氨基酸序列在羧基端蛋白酶结构域同源性较高，在蛋白的二级结构中，无规卷曲所占比重最高，占53.82%～62.50%。系统发育分析表明，埃及伊蚊6个CLIPs存在2个不同的分支，其中1个分支与冈比亚按蚊2个CLIPs有较高的同源性，另1个分支与黑腹果蝇SP5有较高的同源性。时空表达谱结果显示，埃及伊蚊6个CLIPs在4龄幼虫和成蚊中表达水平较为丰富，在蛹期表达水平均较低；在雌性成蚊不同组织中表达水平不同，胸部和脂肪体中均有较高的表达水平，而在马氏管、中肠和卵巢中的表达水平均较低。在细菌感染方面，埃及伊蚊6个CLIPs有着不同的诱导动力学，存在应对微生物侵染时的特异性反应。结论 在埃及伊蚊6个CLIPs蛋白序列中，无规卷曲所占比重最高，在进化关系上，与其他昆虫的丝氨酸蛋白酶有较高的同源性。时空表达谱显示，6个CLIPs在伊蚊发育过程和成蚊各个组织中有着不同的表达模式，在应对不同细菌侵染时有着不同的诱导动力学。
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