p38蛋白激酶信号通路对骨桥蛋白介导的三阴性乳腺癌细胞自噬、凋亡活性的影响

作者：郭满; 翟晓建; 张浩; 李伟汉; 刘明

来源：新乡医学院学报, 2018, 35(12): 1058-1063.

• 三阴性乳腺癌
• 骨桥蛋白
• 自噬
• p38蛋白激酶
• Beclin 1

目的探讨骨桥蛋白(OPN)和自噬相关蛋白Beclin 1在三阴性乳腺癌组织中的表达及OPN下调对p38蛋白激酶(p38MAPK)、Beclin 1表达及乳腺癌细胞自噬、凋亡活性的影响。方法选取2015年1月至2016年12月南阳市中心医院收治的60例女性三阴性乳腺癌患者的癌组织标本为研究对象,另选取同期手术治疗的40例女性乳腺纤维腺瘤或乳腺增生结节患者的正常乳腺组织作为对照;采用免疫组织化学方法检测三阴性乳腺癌组织和正常乳腺组织中OPN和Beclin 1的表达。将MDA-MB-231细胞株分为特异性OPN小干扰RNA(siRNA)实验组(OPN-siRNA组)、非同源阴性CON-siRNA对照组(CON-siRNA组)和mock空白对照组(mock组);以慢病毒介导基因干扰技术制备OPN低表达MDA-MB-231细胞模型,应用透射电镜及流式细胞术检测OPN下调后细胞自噬体形成和凋亡率,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot法检测OPN下调后p38MAPK及Beclin 1的表达。结果 OPN蛋白在乳腺癌组织和正常乳腺组织中的阳性表达率分别为68. 3%(41/60)和12. 5%(5/40),OPN蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率高于正常乳腺组织(χ2=56. 881,P=0. 000); Beclin 1蛋白在乳腺癌组织和正常乳腺组织中的阳性表达率分别为18. 3%(11/60)和42. 5%(17/40),Beclin 1蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率低于正常乳腺组织(χ2=54. 692,P=0. 000);三阴性乳腺癌组织中OPN蛋白表达与Beclin 1蛋白表达呈负相关(r=-0. 713,P=0. 003)。病毒转染48 h后,OPN-siRNA组细胞中OPN mRNA和蛋白相对表达量显著低于CON-siRNA组和mock组(F=57. 170、50. 410,P=0. 001)。OPN表达下调后,OPN-siRNA组细胞中自噬体个数、早期凋亡率显著高于CON-siRNA组和mock组(F=17. 590,P=0. 004; F=23. 180,P=0. 003); OPN-siRNA组细胞中Beclin 1 mRNA和蛋白相对表达量明显高于CON-siRNA组和mock组(F=29. 873、32. 174,P=0. 001),p38MAPK mRNA和蛋白相对表达量低于mock组和CON-siRNA组(F=32. 735、37. 110,P=0. 000); mock组与CON-siRNA组细胞中自噬体个数、早期凋亡率、Beclin 1 mRNA和蛋白相对表达量及p38MAPK mRNA和蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P> 0. 05)。结论抑制OPN表达可促进三阴性乳腺癌细胞自噬和凋亡活性,其作用机制可能与p38MAPK表达下调、Beclin 1表达上调有关。

• 单位
  南阳市中心医院; 新乡医学院