A型禽流感病毒M2蛋白胞外功能区(M2e)基因的原核表达和免疫原性分析

作者：张新涛; 刘明; 杜金玲; 刘春国; 李洪涛; 孙恩成; 石薇琳

来源：中国兽医科学, 2010, (04): 357-362.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2010.04.005

• A型禽流感病毒
• M2e基因
• 原核表达
• 免疫原性 avian influenza A virus
• M2e gene
• prokaryotic expression
• immunogenicity

为研究A型禽流感病毒M2蛋白胞外功能区(M2e)蛋白亚单位疫苗在鸡体的免疫保护力,利用笔者所在实验室已构建的含M2e基因的质粒pGEM-T-1459,获得顺次串联的基因片段3M2e,将其克隆到原核表达载体pMAL-C2x中,经酶切和DNA测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western-blot分析,结果显示,表达出一分子质量为60 ku的可溶性融合蛋白(MBP-3M2e),与预期值相符,该蛋白表达量约占菌体表达量的59.8%。间接免疫荧光和间接ELISA检测结果显示,用纯化后的融合蛋白免疫的SPF鸡血清可与流感病毒的M2蛋白发生反应...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 黑龙江八一农垦大学; 东北农业大学; 农业部; 动物科技学院; 兽医生物技术国家重点实验室