猪β防御素2与猪γ干扰素在毕赤酵母中的融合表达及生物学活性比较

作者：张定勇; 孙蕾; 杨利敏; 刘文军

来源：生物工程学报, 2010, (12): 1652-1659.

DOI：10.13345/j.cjb.2010.12.002

• 重叠延伸PCR
• 猪β防御素2
• 猪γ干扰素
• 融合蛋白
• 毕赤酵母 overlap extension PCR
• PBD-2
• PoIFNγ
• fusion protein
• Pichia pastoris

为了研究猪β防御素2(PBD-2)与猪γ干扰素(PoIFNγ),采用重叠延伸PCR法合成嵌合编码序列PBD-2-PoIFNγ,在此序列的基础上扩增PoIFNγ基因,并分别克隆入毕赤酵母表达载体pPICZαA,构建重组表达质粒pPICZαA-PBD-2-PoIFNγ与pPICZαA-PoIFNγ。经SacI线性化,电击转化巴斯德毕赤酵母X33,筛选阳性重组子,在含0.5%甲醇的BMMY培养基中诱导72h。SDS-PAGE及Western blotting结果表明,所获得的重组子能够分别分泌表达PBD-2-PoIFNγ融合蛋白与PoIFNγ。琼脂扩散法和细胞病变抑制法未检测到融合蛋白的抑菌和抗病毒...

• 单位
  中国科学院; 中国科学院微生物研究所