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摘要
目的 通过髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)多肽两次免疫C57BL/6J小鼠，构建实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型。方法 将8周龄C57BL/6J雌性小鼠按随机数字表法分为EAE组和对照组，每组10只。EAE组采用MOG35-55多肽与完全弗式佐剂混合后的抗原乳剂，于小鼠双侧腹股沟和后肢分4点皮下注射，首次免疫后6 d注射相同剂量的抗原乳剂加强免疫，并且于首次免疫后0、48 h腹腔注射百日咳毒素；对照组采用不含MOG35-55多肽的CFA，其余方法同EAE组。观察两组小鼠的行为学表现并进行神经功能评分；免疫后第19天，取两组小鼠的脑和脊髓组织进行Black Gold髓鞘染色和髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫荧光染色，检测其脱髓鞘情况；小胶质细胞特异性标志物(Iba-1)免疫荧光染色检测两组脑和脊髓组织中小胶质细胞的增殖活化情况。结果 EAE组小鼠在首次免疫后第12天左右开始发病，第19天症状达到高峰，随后开始缓解，发病率为100%，而对照组小鼠只在首次免疫后第14天出现短暂的尾巴无力症状。Black Gold髓鞘染色和MBP免疫荧光染色显示，EAE组小鼠脑和脊髓均出现脱髓鞘；Iba-1免疫荧光染色显示，EAE组小鼠脑和脊髓均出现小胶质细胞增殖活化；而对照组小鼠脑和脊髓并未出现脱髓鞘和小胶质细胞的增殖活化。结论 MOG35-55两次免疫C57BL/6J小鼠，成功构建发病率高的EAE模型，为多发性硬化症的致病机制研究和药物开发奠定基础。
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