与甲型副伤寒杆菌噬菌体 ＬＳＰＡ１早期蛋白 ｇｐ２３与相互作用的宿主蛋白的筛选

作者：毛普加冯梦蝶洪愉许泽仰赵继华杨洪文宋武战王纪爱饶贤才黄芬井申荣曾韦锟

来源：山东大学学报(医学版), 2015, (07): 5.

DOI：10.6040/j.issn.1671-7554.0.2014.903

• 甲型副伤寒杆菌
• 噬菌体
• 细菌双杂交

目的　筛选与甲型副伤寒杆菌（副甲）ＣＭＣＣ５０９７３噬菌体 ＬＳＰＡ１早期蛋白 ＧＰ２３相互作用的宿主蛋白。方法　Ｓａｕ３ＡⅠ酶切副甲基因组，回收 ２５０～１５００ｂｐ的条带与 ｐＡＴ质粒连接，构建 ｐＡＴ副甲基因文库；扩增噬菌体早期基因 ｇｐ２３，与 ｐＢＴ构建 ｐＢＴｇｐ２３作为诱饵质粒；将 ｐＡＴ副甲基因文库和 ｐＢＴｇｐ２３共转 ＫＳ宿主菌，利用细菌双杂交技术筛选蓝色单菌。检测筛选出阳性单菌的 ＬａｃＺ活性，并提质粒测序，分析其编码蛋白。结果　成功构建副甲基因文库，其库容量满足实验的要求，基因文库阳性率接近 １００％；筛选出的插入基因为编码嘌呤透性酶。结论　宿主蛋白（嘌呤透性酶...

• 单位
  昆明学院; 昆明理工大学; 中国人民解放军陆军军医大学; 成都军区昆明总医院