Dystrophin基因常见易缺失外显子片段的克隆

作者：杜文津; 万琪; 陈晋文; 吴保仁

来源：中国优生与遗传杂志, 2010, (03): 14-17.

DOI：10.13404/j.cnki.cjbhh.2010.03.064

• Dystrophin基因
• 分子克隆
• 基因缺失
• 外显子 Dystrophin gene
• Molecular cloning
• Gene deletion
• Exon

目的对Dystrophin基因18个常见易缺失外显子片段进行克隆、鉴定,以克隆产物作为核苷酸探针为研制Dystrophin基因缺失检测微阵列作准备。方法以人类基因组DNA为模板,应用18对引物,对Dystrophin基因常见易缺失外显子片段进行PCR扩增。将扩增产物与pGEM-TEasy载体连接,转化E.coli JM109感受态细胞。通过平板培养,挑选阳性克隆。提取重组质粒,Not I酶切,获得完整的探针片段,并作测序鉴定。通过核酸序列数据库相似性检索工具验证序列的来源及其与GeneBank收录序列的相似性。结果PCR扩增出18个片段,与Dystrophin基因预期扩增片段大小相一致。重组克...

• 单位
  江苏省人民医院; 第四军医大学; 西京医院; 中国人民解放军空军总医院