凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)消化性蛋白酶的分布及种类

作者：曹启猛; 于跃芹; 王雷; 王宝杰

来源：饲料工业, 2016, 37(10): 18-23.

DOI：10.13302/j.cnki.fi.2016.10.005

• 凡纳滨对虾
• 消化性蛋白酶
• 抑制剂实验
• 酶谱分析

为探究凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)消化性蛋白酶的分布及种类,文章采用偶氮酪蛋白(Azocasein)水解法检测p H值和温度对凡纳滨对虾肝胰腺、胃和肠道中总蛋白酶活力的影响及在30℃和最适p H值条件下消化蛋白酶的分布,并利用酶抑制剂实验(Inhibition assays)和含底物的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(substrate-SDS-PAGE)法对消化性蛋白酶的种类进行对比分析。结果得到:肝胰腺、胃和肠道中消化性蛋白酶均在p H值8.5和温度50℃时蛋白酶比活力最大;对比三种消化腺蛋白酶的比活力得到肝胰腺>胃>肠道(P<0.05);酶抑制剂实验表明,一种丝氨酸蛋白酶抑制剂——PMSF对肝胰腺、胃和肠道中消化性蛋白酶表现出最强的抑制效果,抑制率分别为(79.43±0.58)%、(71.18±0.18)%和(71.72±1.37)%,抑制效果最差的为半胱氨酸蛋白酶抑制剂碘乙酰胺(IAM);substrate-SDS-PAGE实验中发现三种消化腺中均至少发现含有8种分子量不同的蛋白酶,且以丝氨酸蛋白酶为主,分子量分别为48.4、32.5、26.9、25.2、21.6、19.8、15.4、13.6 kDa。

• 单位
  青岛科技大学; 中国科学院