蓝舌病病毒VP7基因的原核表达及反应原性分析

作者：郝春霞; 独军政; 高闪电; 陈建文; 常惠芸; 薛慧文

来源：甘肃农业大学学报, 2013, (06): 19-22+28.

DOI：10.13432/j.cnki.jgsau.2013.06.004

• 蓝舌病病毒
• VP7基因
• 克隆
• 原核表达
• 蛋白质印迹法 bluetongue virus
• VP7gene
• clone
• prokaryotic expression
• Western-blotting

为获得蓝舌病病毒(BTV)VP7基因原核表达蛋白并检测其生物学活性,根据Genbank登录的BTV VP7基因,设计1对引物,运用RT-PCR扩增技术获得BTV VP7目的片段,然后定向克隆到pPROEXHTb原核表达载体上,再转化重组质粒pPROEXHTb-VP7到BL21感受态细胞,IPTG诱导,表达产物纯化,进行SDS-PAGE鉴定及Western-blot反应原性分析.结果表明:表达的VP7目的蛋白大小为35ku,Western-blot分析表明纯化后的蛋白可以与BTV单克隆抗体发生特异性反应.

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 甘肃农业大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所