沉默Ku70后PARP1参与DNA双链断裂修复

作者：程巧; 厉红元; 刘胜春; 李凡; 任国胜

来源：第三军医大学学报, 2011, (03): 286-289.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2011.03.010

• DNA双链断裂
• Ku70
• PARP1 DNA double strand break
• Ku70
• PARP1

目的研究碱基切除修复途径(base excision repair,BER)关键因子PARP1在Ku70缺失的条件下是否参加DNA双链断裂(double-strand break,DSB)的修复。方法针对人类Ku70构建编码shRNA序列的重组表达载体并转染细胞,建立Ku70蛋白表达沉默的细胞株。以高效的DNA双链断裂诱导剂刺孢霉素calicheamycin诱导DSB形成,在Ku70沉默或联合PARP1抑制剂条件下,通过结晶紫染色法检测DSB对细胞存活率的影响,以及Western blot检测H2AX的磷酸化状态。根据与染色质相互作用的差别,分段提取细胞蛋白组分,Western blot检测P...

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院; 重庆医科大学