达克替尼通过抑制EGFR表达促白介素-6诱导非小细胞癌细胞株A549凋亡的效果

作者：段昕波; 曹晓慈; 杜东杰

来源：毒理学杂志, 2020, 34(01): 51-56.

DOI：10.16421/j.cnki.1002-3127.2020.01.011

• 达克替尼
• Ark-5
• ERK1/2
• EGFR
• 白介素-6
• A549

目的旨在探讨达克替尼通过Ark-5/MAPK通路抑制EGFR表达促白介素-6(IL-6)诱导非小细胞癌细胞株A549凋亡的效果。方法 A549分成对照组、诱导组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,诱导组添加25 ng/ml IL-6,低剂量组添加25 ng/ml IL-6+0. 1μmol/L达克替尼,中剂量组添加25 ng/ml IL-6+1μmol/L达克替尼,高剂量组添加25 ng/ml IL-6+10μmol/L达克替尼,对照组添加等剂量磷酸盐缓冲液(PBS)。MTT法检测各组A549细胞存活率。荧光染色检测各组A549细胞凋亡形态。蛋白免疫印迹(Western blot)法测定各组A549细胞凋亡相关蛋白的表达。结果 MTT检测结果显示,高剂量组和中剂量组的A549细胞存活抑制率明显高于低剂量组和对照组(P<0. 05),中剂量组A549细胞存活抑制率最高(P<0. 05)。染色结果显示,对照组内A549细胞呈现淡蓝色椭圆形或圆形,存在部分蓝白色荧光凋亡细胞;诱导组内A549细胞少见蓝色荧光凋亡细胞;经达克替尼干预后,中剂量组A549细胞凋亡细胞数量最多,凋亡蓝白色荧光细胞质凝聚联,高剂量组凋亡蓝白色荧光细胞数量多于低剂量组。对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组A549细胞凋亡率明显高于诱导组(P<0. 01),低剂量组、中剂量组、高剂量组A549细胞凋亡率均明显高于对照组(P<0. 01),中剂量组的细胞凋亡率最高。对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组EGFR、Ark-5、ERK1/2、p-EGFR、p-Ark-5和p-ERK1/2蛋白表达明显低于诱导组(P<0. 01),中剂量组EGFR、Ark-5、ERK1/2、p-EGFR、p-Ark-5和p-ERK1/2蛋白表达明显高于低剂量组和高剂量组(P<0. 01)。结论达克替尼能够通过抑制Ark-5/MAPK通路降低EGFR表达,从而促进IL-6诱导后非小细胞癌细胞株A549凋亡。

• 单位
  河北省人民医院