HIV-1 Tat对KSHV感染SK-N-SH细胞的影响

作者：周锋; 秦娣; 卢春

来源：南京医科大学学报(自然科学版), 2009, 29(03): 296-302.

• 卡波济肉瘤相关疱疹病毒
• HIV-1 Tat
• 共培养

目的:初步探索人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)反式激活蛋白(Tat)对卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)感染人神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH细胞(SK细胞)的影响。方法:将原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞系BCBL-1细胞与SK细胞共培养,观察SK细胞的细胞病变效应(CPE)并采用Real-timePCR检测KSHV在SK细胞中的复制。重组质粒Tat+pcDNA3.1(+)和空载体pcDNA3.1(+)分别转染SK细胞,经G418筛选获得抗性克隆,以RT-PCR和Westernblot检测Tat基因的表达。通过BCBL-1细胞与SK-Tat/SK-vector细胞共培养,采用Real-timePCR检测SK-Tat/SK-vector细胞中KSHV裂解期基因ORF50和26的mRNA表达。结果:细胞共培养后,SK细胞出现CPE且SK细胞中检测到KSHV的基因。RT-PCR和Westernblot均在Tat预期位置检测到特异性条带。Real-timePCR检测显示Tat降低KSHVORF50和26mRNA转录水平。结论:初步探索表明,在细胞共培养过程中Tat蛋白抑制KSHV在SK细胞中的复制。

• 单位
  南京医科大学