摘要
目的探讨下调SMARCC1对人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖及端粒酶活性的影响及其可能的机制。方法采用siRNA下调MCF-7细胞SMARCC1基因,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA法检测细胞端粒酶活性,分别采用qRT-PCR法及Western Blot检测细胞凋亡相关Caspase-3、端粒酶相关基因hTERT的m RNA及蛋白表达水平。结果转染后24、48、72和96 h,SMARCC1下调组的MCF-7细胞增殖均低于对照组(P <0.05),且具有时间依赖性;SMARCC1下调组晚期凋亡率(6.8±0.5)%高于对照组晚期凋亡率(0.9±0.1)%;转染24及48 h后检测两组细胞端粒酶活性,结果显示,转染24及48 h后SMARCC1下调组MCF-7细胞端粒酶活性均低于对照组;SMARCC1下调组(0.804±0.014)的MCF-7细胞Caspase-3 m RNA表达水平高于于对照组[(0.478±0.005),(t=5.781,P <0.01)];SMARCC1下调组(0.395±0.010)的MCF-7细胞hTERT mRNA表达水平低于对照组[(0.739±0.008),(t=6.203,P <0.01)]。Western Blot实验结果表明,SMARCC1下调组的MCF-7细胞Caspase-3蛋白表达水平高于对照组(P <0.01);SMARCC1下调组MCF-7细胞的hTERT蛋白表达水平低于对照组(P <0.01)。结论下调SMARCC1抑制了人乳腺癌细胞(MCF-7)细胞增殖及促进其凋亡,其机制可能与端粒酶活性被抑制有关。
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单位武汉大学人民医院