糖尿病肾病大鼠肾小动脉骨基质蛋白表达及其与MCP-1的关系

作者：赵安菊; 黄颂敏; 欧三桃; 刘芳; 陈泽君; 胡章学; 唐万欣

来源：四川大学学报（医学版）, 2012, 43(03): 414-419.

DOI：10.13464/j.scuxbyxb.2012.03.022

• 糖尿病肾病
• 血管钙化
• 炎症因子
• 骨基质蛋白

目的观察糖尿病肾病(DN)大鼠肾实质内小动脉上骨基质蛋白的表达及其变化规律,初步探讨其与炎症因子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的关系及对糖尿病肾病血管病变的影响。方法设对照组(N组,30只)和糖尿病肾病组(DN组,30只)。4周、12周和24周每组各处死10只大鼠,血生化指标按常规检测;茜素红染色观察肾实质内小动脉周围钙盐沉积,免疫组化方法、原位杂交法检测各时间点肾小动脉中骨基质蛋白核心结合因子α1(cbfα1)、骨形态蛋白2(BMP-2)及MCP-1蛋白和基因表达。以实时荧光定量PCR法作BMP-2及基质Gla蛋白(MGP)的基因定量。结果①DN组各时间点血糖、血尿素氮及24h尿蛋白量均较N组增高(P<0.05),自第12周开始,DN组血肌酐、血磷较N组增高(P<0.05)。②茜素红染色DN组第4周～12周时偶见肾内小动脉少许点状红色钙盐沉积,第24周时可见肾实质内小动脉及周围组织有较多红色点片状沉积,N组茜素红染色为阴性。③免疫组化显示DN组肾小动脉4周时已有cbfα1、BMP-2表达,随时间延长表达逐渐增强,24周表达最强,各时间点均高于N组(P<0.05),原位杂交显示cbfα1、BMP-2仅在肾小动脉中有表达,表达趋势同免疫组化结果;DN组肾实质内小动脉MCP-1蛋白及mRNA在4、12周表达无明显差异,24周表达明显上调,N组肾小动脉无MCP-1mRNA表达。实时荧光定量PCR显示DN组4周时BMP-2mRNA已有表达,随时间延长表达逐渐升高,24周最高(P<0.05);DN组MGP表达量4周最高,随时间延长表达逐渐降低,24周最低(P<0.05)。而N组BMP-2和MGP mRNA各时间点表达量差异均无统计学意义。④DN组cbfα1及BMP-2基因与蛋白均与MCP-1呈正相关。结论①DN大鼠肾内小动脉钙化前即已有骨基质蛋白的表达;②MCP-1可能影响骨基质蛋白cbfα1的表达;③cbfα1、BMP-2、MGP及MCP-1可能参与了DN血管病变。

• 单位
  贵州省人民医院; 四川大学华西医院