组蛋白甲基转移酶EZH2调控脓毒症诱导的T细胞功能障碍的作用及分子机制

作者：李哲; 赵冬旸; 周晓慧; 唐伦先^*

来源：中华危重病急救医学, 2022, 34(04): 357-361.

• 脓毒症
• T淋巴细胞
• 组蛋白甲基转移酶
• EZH2选择性抑制剂GSK126
• 程序性死亡受体-1

目的探讨组蛋白甲基转移酶果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)调控脓毒症T淋巴细胞功能失调的作用及机制。方法按随机数字表法将24只雄性C57BL/6小鼠分为假手术组、脓毒症模型组〔盲肠结扎穿孔术(CLP)+二甲基亚砜(DMSO)组〕及EZH2选择性抑制剂干预组(CLP+GSK126组), 每组8只。采用CLP法制备脓毒症小鼠模型;假手术组小鼠不结扎穿刺盲肠, 其余操作同CLP+DMSO组。CLP+DMSO组及CLP+GSK126组小鼠术后立即分别腹腔注射DMSO或GSK126(10 mg/kg)。术后24 h处死小鼠取肠系膜淋巴结, 采用流式细胞仪检测T淋巴细胞EZH2表达、T淋巴细胞凋亡率、细胞增殖标志物ki-67抗原阳性T淋巴细胞(ki-67+)比例、γ-干扰素阳性T淋巴细胞(IFN-γ+)比例、程序性死亡受体-1阳性T淋巴细胞(PD-1+)比例及程序性死亡配体-1阳性T淋巴细胞(PD-L1+)比例。结果与假手术组相比, CLP+DMSO组小鼠肠系膜淋巴结T淋巴细胞EZH2表达升高。与CLP+DMSO组相比, CLP+GSK126组小鼠肠系膜淋巴结CD3+比例升高(0.70±0.02比0.50±0.07, P<0.01), 表明抑制EZH2可增加脓毒症小鼠淋巴结T淋巴细胞数量;同时, CLP+GSK126组淋巴结CD4+及CD8+细胞中ki-67+比例显著上升(CD4+:0.74±0.05比0.63±0.04, CD8+:0.82±0.06比0.70±0.04, 均P<0.05), 表明抑制EZH2可增加脓毒症小鼠淋巴结增殖活性较高的T淋巴细胞比例;另外, CLP+GSK126组小鼠肠系膜淋巴结T淋巴细胞凋亡率与CLP+DMSO组比较差异无统计学意义〔CD4+:(21.53±2.87)%比(20.48±3.21)%, CD8+:(8.34±1.02)%比(7.71±1.38)%, 均P>0.05〕, 表明抑制EZH2对脓毒症小鼠淋巴结T淋巴细胞凋亡无明显影响。与CLP+DMSO组相比, CLP+GSK126组小鼠肠系膜淋巴结IFN-γ+CD4+、IFN-γ+CD8+比例也显著增加(IFN-γ+CD4+:0.31±0.11比0.14±0.06, IFN-γ+CD8+:0.30±0.10比0.13±0.06, 均P<0.05), 表明抑制EZH2可增强脓毒症小鼠淋巴结T淋巴细胞IFN-γ分泌能力;同时, CLP+GSK126组小鼠肠系膜淋巴结PD-1+CD8+比例较CLP+DMSO组显著下降(0.092±0.006比0.135±0.004, P<0.01), 表明抑制EZH2可降低脓毒症小鼠淋巴结CD8+细胞PD-1的表达量, 但对PD-L1+比例无明显影响。结论 EZH2参与了脓毒症诱导的T淋巴细胞功能障碍的调控, 该作用可能部分通过调节PD-1表达介导。

• 单位
  同济大学附属东方医院