检测牛IL-4双抗体夹心ELISA方法的建立

作者：朱月姝; 文志发; 孔文君; 徐正中; 焦新安; 陈祥^*

来源：扬州大学学报（农业与生命科学版）, 2023, 44(03): 65-71.

DOI：10.16872/j.cnki.1671-4652.2023.03.009

• 检测牛白细胞介素-4
• 单克隆抗体
• 抗体夹心ELISA

为利用牛白细胞介素-4 (BoIL-4)的特异性单克隆抗体(MAb)建立检测BoIL-4的双抗体夹心ELISA方法，以多种ELISA方法对7株抗BoIL-4的单抗进一步筛选，得到反应最佳的2株单抗8B7和4A10,以A9表达的重组BoIL-4为阻断剂的阻断ELISA试验中，表明这2株单抗也可识别所构建的细胞系A9表达的重组BoIL-4。以单抗8B7作为包被抗体，以标记了HRP的单抗4A10作为检测抗体建立的双抗体夹心ELISA方法可检测大肠埃希菌、毕赤酵母和Flp-In-293细胞系3种表达系统表达的重组BoIL-4,最低检测限分别为0.25、8和2 ng·mL-1,且对A9细胞系上清中表达的BoIL-4检测效果和特异性良好。该研究建立的BoIL-4双抗体夹心ELISA方法为深入研究BoIL-4、开发BoIL-4 ELISA检测试剂盒奠定了基础。

• 单位
  扬州大学; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心