干扰Twist表达对肾癌细胞糖酵解水平的影响

作者：肖正红; 谢广伦; 翟焕阁; 王苏芳

来源：郑州大学学报(医学版), 2019, 54(06): 891-894.

DOI：10.13705/j.issn.1671-6825.2018.07.161

• 肾癌
• Twist
• 糖酵解

目的:研究干扰Twist表达对肾癌细胞糖酵解水平的影响。方法:用重组Twist shRNA慢病毒(Twist shRNA组)和阴性对照慢病毒(shRNA-NC组)感染肾癌细胞A498,用Real-time PCR和Western blot法测定Twist的表达,MTT法测定细胞存活率,平板克隆实验检测克隆形成能力,Western blot法检测细胞中己糖激酶2(HK2)和丙酮酸激酶M2亚型(PKM2)蛋白表达水平,用乳酸脱氢酶比色法检测乳酸分泌水平,用葡萄糖氧化酶法检测葡萄糖消耗量,用比色法检测细胞中ATP含量。以未感染慢病毒的细胞为空白对照。结果:与空白对照组和shRNA-NC组比较,Twist shRNA组肾癌细胞存活率和克隆形成率,细胞中HK2和PKM2蛋白表达水平,乳酸分泌水平,葡萄糖消耗量,以及细胞中ATP含量均降低(P<0.05)。结论:下调Twist可抑制肾癌细胞糖酵解关键酶的表达,降低细胞能量代谢水平,抑制细胞生长。

• 单位
  南阳南石医院; 郑州大学