牛膝多糖通过阻断PPARγ/TRPV4通路抑制大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化

作者：岳宗进; 刘汝银^*; 于露; 王新立; 徐向阳

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2022, 38(12): 1111-1117.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009507

• 骨髓间充质干细胞(BMSC)
• 细胞分化
• 牛膝多糖(ABPS)
• 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)
• 瞬时受体电位香草素通道蛋白4(TRPV4)

目的 探讨牛膝多糖(ABPS)对骨髓间充质干细胞(BMSC)成脂分化的影响及作用机制。方法 取5只SD大鼠处死后解剖并分离其BMSC,鉴定后贴壁传代培养至对数生长期，用不同剂量ABPS作用48 h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率，选择对BMSC生长无毒性的ABPS最高浓度进行后续实验。将细胞随机分为对照组、 ABPS组、罗格列酮组和ABPS联合罗格列酮组，MTT法检测细胞存活率，分光光度法检测BMSC中甘油三酯(TG)水平，油红O染色观察BMSC中脂滴形成情况，实时定量PCR和Western blot法分别检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、瞬时受体电位香草素通道蛋白4(TRPV4)、转录因子CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的mRNA和蛋白表达。结果 ABPS≤200 mg/L作用BMSC 48 h对BMSC生长无明显毒性作用，400 mg/L ABPS组细胞存活率降低。与对照组比较，200 mg/L ABPS处理组细胞TG水平降低，PPARγ、 TRPV4、 C/EBPα mRNA和蛋白相对表达量降低，胞质脂滴数量减少，罗格列酮组细胞存活率降低，TG水平升高，PPARγ、 TRPV4、 C/EBPα mRNA和蛋白相对表达量升高，胞质脂滴数量增多；与ABPS组比较，ABPS联合罗格列酮组细胞存活率降低，TG水平升高，PPARγ、 TRPV4、 C/EBPα mRNA和蛋白相对表达量升高，胞质脂滴数量增多；与罗格列酮组比较，ABPS联合罗格列酮组细胞存活率升高，TG水平降低，PPARγ、 TRPV4、 C/EBPα mRNA和蛋白相对表达量降低，胞质脂滴数量减少。结论ABPS可以抑制BMSC成脂分化，可能与阻断PPARγ/TRPV4通路有关。

• 单位
  河南中医药大学; 河南省中医院