Wistar大鼠SONIC HEDGEHOG基因的克隆和表达

作者：孙朝晖; 赖燕来; 曾文文; 左焕琮; 谢佐平

来源：基础医学与临床, 2005, 25(01): 44-48.

DOI：10.3969/j.issn.1001-6325.2005.01.010

• SHH-N
• Wistar大鼠
• 脊索
• 序列分析
• 蛋白表达

为了获得SHH蛋白以研究它在治疗神经变性疾病中的作用 ,本室提取不同胚龄Wistar胎鼠中的总RNA ,应用RT PCR技术获得SHH N的cDNA ,重组于pGEM T载体 ,经测序鉴定后 ,构建原核表达质粒并获得表达菌株Q15 SHH N ,然后诱导SHH蛋白的表达。结果发现 ,在E11.5 E2 0 .5胎鼠的脊索中能克隆到 6 30bp的cDNA片段 ,并且随胚龄增加 ,此片段的表达量逐渐减少 ;测序结果显示 ,此片段及其所编码的氨基酸序列同数据库中人、小鼠和SD大鼠的SHH N的序列有较高同源性 ;表达菌株经诱导后产生约 2 1kD的融合蛋白。提示SHH N是一种发育相关基因 ,在不同种属中的同源性较高 ,并且在原核系统中能进行表达

• 单位
  清华大学玉泉医院; 清华大学