牛新孢子虫内标多重PCR检测方法的试验

作者：唐慧芬; 季新成; 于学辉

来源：中国兽医杂志, 2012, (04): 23-26.

• 新孢子虫病
• 多重PCR
• 内标
• 共扩增 Neospora caninum
• multiplex PCR
• internal control
• co-amplification

本试验以牛新孢子虫NcSAG1基因、Nc-5基因和NcSRS2基因作为检测新孢子虫病的目的基因,以牛性腺(prolac-tin)基因作为内标对反应过程进行监测,对上述基因各设计1对引物。结果表明,4对引物可分别扩增出201bp、231bp、256bp和156bp的目的条带。经反应条件的优化,该方法具有较好的灵敏度,各质粒在103 copies/反应时,均可于同一管中扩增出较清晰的目的条带,只比单重PCR的灵敏度低了10倍,且不受内标模板存在的影响。经临床应用研究,该方法具有较好的特异性和重复性,可用来对新孢子虫进行快速准确的检测。

• 单位
  石河子大学; 新疆出入境检验检疫局