雌激素受体α基因沉默介导转化生长因子-β通路对乳腺癌细胞活性的影响

作者：胡泽成; 黄祯; 陈前奇; 刘红光^*

来源：中华实验外科杂志, 2022, 39(11): 2125-2129.

DOI：10.3760/cma.j.cn421213-20220528-00402

• 雌激素受体α
• 转化生长因子-β信号通路
• 乳腺癌
• 细胞活性
• 上皮-间充质转化

目的探讨雌激素受体α(ESR1)基因沉默介导转化生长因子-β(TGF-β)信号通路对乳腺癌细胞活性的影响及其作用机制。方法选取南华大学附属第一医院58例乳腺癌患者的癌组织及癌旁组织标本。免疫组织化学法检测组织中ESR1蛋白表达阳性率差异。细胞分为5组, Blank、NC、HA-ESR1、ESR1-siRNA、SRI-011381 hydrochloride + ESR1-siRNA组。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)法分别检测各组ESR1、TGF-β1、TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的mRNA和蛋白表达水平。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖活性, 多组间比较采用单因素方差分析。结果癌组织中ESR1阳性表达率显著高于癌旁组织, 差异有统计学意义[癌组织:阳性表达40例, 阳性率68.97%(40/58)比25.86%(15/58), χ2=7.877, P<0.05]。ESR1-siRNA组ESR1(mRNA:0.98±0.01比0.54±0.02, t=34.08;蛋白:0.82±0.04比0.36±0.04, t=14.08)及TGF-β1、TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ的mRNA和蛋白表达量均明显低于Blank组和NC组(mRNA:TGF-β1 1.00±0.04比0.54±0.06, t=11.05;TGF-βRⅠ 1.00±0.04比0.63±0.03, t=12.82;TGF-βRⅡ 1.00±0.05比0.44±0.04, t=15.15;蛋白:TGF-β1 1.53±0.07比0.50±0.06, t=19.35;TGF-βRⅠ 1.03±0.08比0.42±0.04, t=11.81;TGF-βRⅡ 0.84±0.09比0.37±0.03, t=8.58, P<0.05), N-cadherin和Vimentin mRNA和蛋白表达量明显低于Blank组和NC组, 而E-cadherin表达明显高于Blank组和NC组(mRNA:E-cadherin 1.00±0.03比0.55±0.04, t=15.59;N-cadherin 1.00±0.03比0.67±0.04, t=11.43;Vimentin 1.00±0.02比1.83±0.11, t=12.86;蛋白:E-cadherin 1.33±0.09比0.78±0.05, t=9.25;N-cadherin 2.11±0.12比1.36±0.08, t=9.01;Vimentin 0.56±0.05比1.05±0.07, t=9.87, P<0.05), 细胞增殖活性低于Blank组和NC组(24 h:0.56±0.05比0.35±0.03, t=6.24;48 h:0.88±0.08比0.48±0.04, t=7.75;72 h:1.09±0.10比0.74±0.07, t=4.97, P<0.05), 差异均有统计学意义;而HA-ESR1组的各指标变化趋势逆转;SRI-011381 hydrochloride + ESR1-siRNA组仅ESR1表达低于ESR1-siRNA组(mRNA:0.54±0.02比0.97±0.02, t=26.33;蛋白:0.36±0.04比0.80±0.04, t=13.47, P<0.05), 差异有统计学意义。结论沉默ESR1基因可能抑制TGF-β信号通路的激活, 进而抑制乳腺癌上皮-间充质转化及肿瘤细胞活性。

• 单位
  深圳大学; 南华大学附属第一医院