CSFV与PRRSV双重RT-PCR检测方法的建立及应用

作者：杨伟; 单春兰; 李林; 高洪^*; 严玉霖; 赵汝; 敖平星; 高利波; 刘超英; 富国文; 高斌; 景麟稀; 茶金龙; 王浩

来源：畜牧与兽医, 2019, 51(10): 71-75.

• 猪瘟病毒
• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 双重RT-PCR
• 检测方法

为建立能同时检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的RT-PCR方法,根据CSFV和PRRSV的保守区域各设计1对特异性引物,预期扩增片段大小分别为356和546 bp,通过对反应条件的优化及特异性、灵敏性和重复性试验,建立了CSFV和PRRSV的双重RT-PCR方法。结果显示:该方法能特异检测CSFV和PRRSV的cDNA最低量分别为0.96、1.48 ng,而对猪伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒(PCV)检测结果均为阴性;利用建立的双重RT-PCR对云南省部分地区送检的174份疑似CSFV及PRRSV感染的病料进行检测显示,CSFV感染率为24.14%,PRRSV感染率为47.70%,CSFV与PRRSV的混合感染率为16.67%,检测结果与单一RT-PCR结果相一致,且具有良好的可重复性;利用免疫组织化学方法对部分检测结果加以验证,验证结果与检测结果均一致。本研究成功建立了CSFV和PRRSV双重RT-PCR检测方法,为二者的快速检测和分子流行病学调查提供了一种有效手段。

• 单位
  云南农业大学