摘要

目的:证实宫颈癌细胞特异性细胞膜穿透肽特异性穿膜并优化穿膜条件。方法:将编码人乳头瘤病毒(HPV)阳性宫颈癌细胞特异性穿膜肽(PTP)的cDNA片断与编码绿色荧光蛋白(GFP)的基因片断融合,克隆至原核表达质粒pET15b克隆位点,构建pET15b-GFP-PTP重组原核表达载体。转化大肠杆菌BL21(DE3)并表达GFP-PTP融合蛋白,纯化后的GFP-PTP融合蛋白作用于体外培养的HPV阳性宫颈癌细胞株HeLa,Siha,肺癌细胞株A549及正常脐静脉内皮细胞ECV304。利用合成的标记短肽探讨优化穿膜条件。结果:荧光显微镜观察发现,与融合蛋白GFP-PTP共孵育后的Hela和Siha细胞...

  • 单位
    高分子物理与化学国家重点实验室; 三峡大学; 中科院长春应用化学研究所; 杭州市第三人民医院