信号肽类型对新布尼亚病毒SFTSV Gn蛋白靶向表达特征影响的研究

作者：张凡; 张娟; 徐家馨; 吴玉龙; 李波清^*; 乔媛媛^*

来源：中国病原生物学杂志, 2023, 18(02): 132-140.

DOI：10.13350/j.cjpb.230202

• 发热伴血小板减少综合征病毒
• 信号肽
• 分泌
• 重组蛋白

目的 研究不同类型信号肽对新布尼亚病毒(SFTSV)包膜蛋白Gn表达的影响。方法 以SFTSV(SD4毒株)M段为模板PCR扩增Gn基因，双酶切后分别连接至A16H和pHL表达载体，连接产物转染293T细胞，收集细胞和上清进行Western blot、免疫荧光以及质谱检测，分析Gn重组蛋白的表达情况；ELISA检测Gn重组蛋白的结合活性。结果 成功构建缺失载体信号肽的pA16H-Gn质粒和包含信号肽的sp-pA16H-Gn质粒，以及携带另一种载体信号肽的pHL-Fc-Gn质粒。缺失载体信号肽的pA16H-Gn质粒在细胞内外均不表达Gn重组蛋白(rGn-Fc),包含A16H载体信号肽的sp-pA16H-Gn质粒在细胞内表达Gn重组蛋白(rGn-Fc),但不能分泌表达，包含pHL载体信号肽的pHL-Fc-Gn质粒可将Gn重组蛋白(rGn-Fc)分泌表达到胞外，且具有结合活性。结论 载体本身携带的信号肽会影响SFTSV Gn重组蛋白的表达，不同信号肽影响重组蛋白的表达定位。该研究为SFTSV Gn重组蛋白的开发奠定了基础，同时也为SFTSV重组疫苗的研究提供了新思路。

• 单位
  基础医学院; 滨州医学院