miR-34a-5p通过调控MDM4对糖尿病性白内障晶状体上皮细胞间质转化的影响

作者：王心淼; 王玉珏; 郑丽莹; 张敬轩; 陈晔^*

来源：眼科新进展, 2023, 43(11): 858-862.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2023.0172

• miR-34a-5p
• 鼠双微体4
• 糖尿病性白内障
• 间质转化

目的 探讨miR-34a-5p通过调控鼠双微体4(MDM4)对糖尿病性白内障晶状体上皮细胞(LEC)间质转化(EMT)的影响。方法 体外培养LEC,对LEC进行转染及双荧光素酶检测。实验分为对照组、高糖组、miR-NC组和miR-34a-5p抑制物组。采用MTT法和细胞划痕实验检测LEC细胞增殖和迁移水平，采用酶联免疫吸附试验检测LEC中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平，采用RT-qPCR检测LEC中miR-34a-5p、MDM4、转化生长因子-β2(TGF-β2)mRNA水平，采用Western blot检测LEC中MDM4、TGF-β2、β-catenin和E-cadherin蛋白表达水平。结果 miR-34a-5p对MDM4有潜在的结合位点。与对照组和miR-NC组相比，miR-34a-5p抑制物组LEC中MDM4-MUT荧光素酶活性均明显降低(均为P<0.05),对照组和miR-NC组LEC中MDM4-MUT荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05);对照组、miR-NC组及miR-34a-5p抑制物组LEC中MDM4-WT荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比，高糖组、miR-NC组和miR-34a-5p抑制物组LEC细胞增殖率、划痕愈合率、MDA、miR-34a-5p、TGF-β2 mRNA、TGF-β2蛋白和β-catenin蛋白均增加，SOD、MDM4 mRNA和蛋白、E-cadherin蛋白均降低(均为P<0.05);与高糖组和miR-NC组相比，miR-34a-5p抑制物组LEC细胞增殖率、划痕愈合率、MDA、miR-34a-5p、TGF-β2 mRNA和蛋白、β-catenin蛋白均降低，SOD、MDM4 mRNA和蛋白、E-cadherin蛋白均增加(均为P<0.05);高糖组与miR-NC组LEC各指标差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 miR-34a-5p在糖尿病性白内障LEC细胞模型中表达上调，下调miR-34a-5p可以靶向促进MDM4的表达，抑制高糖诱导的LEC的EMT进程。

• 单位
  内蒙古医科大学; 内蒙古自治区人民医院