MicroRNA-26a-5p通过抑制TRPC6表达减轻糖尿病肾脏病足细胞损伤

作者：周燕; 周海燕; 刘南池; 徐岩; 张行健; 丁琳; 马瑞霞^*

来源：中华肾脏病杂志, 2022, 38(04): 336-343.

• 足细胞
• 微RNAs
• TRPC阳离子通道
• 糖尿病肾脏疾病
• MiR-26a-5p
• TRPC6

目的探讨microRNA-26a-5p(miR-26a-5p)对糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease, DKD)足细胞损伤的保护作用及其机制。方法 (1)体内实验:4周龄db/db小鼠按数字表法被分为db/db组、db/db+agomir-NC组、db/db+miR-26a-5p agomir组, 每组10只, 设同周龄db/m小鼠10只作为正常对照组。饲养至10周龄时观察各组小鼠肾组织病理改变, 检测肾脏肥大指数(kidney weight/body weight, KW/BW)、空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)和尿白蛋白肌酐比(urinary albumin to creatinine ratio, ACR)等指标;采用荧光原位杂交法观察miR-26a-5p的定位, 实时荧光定量PCR法测定肾组织miR-26a-5p水平, 免疫组化及Western印迹法测定瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel-6, TRPC6)和Nephrin表达。(2)体外实验:小鼠足细胞(MPC5)被分为正常糖组、高渗组、高糖组、高糖+miR-26a-5p mimic组和高糖+mimic-NC组共5组, 测定各组足细胞miR-26a-5p及TRPC6和Nephrin蛋白的表达水平, 通过荧光素酶报告基因实验验证miR-26a-5p和TRPC6 mRNA的靶向结合关系。结果 (1)体内实验:与db/m小鼠相比, db/db小鼠肾组织光镜下见肾小球体积增大, 电镜下见基底膜增厚, 足突融合率增加, ACR、FBG和血脂升高(均P<0.01), miR-26a-5p及Nephrin表达减少(均P<0.05), 而TRPC6表达增多(P<0.05);与db/db+agomir-NC组相比, db/db+miR-26a-5p agomir组小鼠肾脏病理改变减轻, 肾组织TRPC6表达和ACR降低(均P<0.05), Nephrin表达增多(P<0.05)。(2)体外实验:与正常糖组比较, 高糖组足细胞miR-26a-5p表达减少(P<0.01), Nephrin表达减少而TRPC6表达增多(均P<0.05);与高糖+mimic-NC组比较, 高糖+miR-26a-5p mimic组足细胞TRPC6表达减少(P<0.05), Nephrin表达增加(P<0.05);荧光素酶实验提示miR-26a-5p靶向调节TRPC6表达。结论 DKD足细胞中miR-26a-5p表达减少, miR-26a-5p可以通过抑制TRPC6表达减轻DKD足细胞损伤。

• 单位
  青岛大学附属医院