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摘要
目的探讨急性低氧诱导人肝癌细胞(Huh-7、Hep3B)差异表达基因的筛选及其功能。方法常规培养Huh-7、Hep3B细胞,随机取部分细胞置于常氧条件(空气、5%CO2)下培养,取部分细胞置于低氧条件(1%O2、5%CO2、94%N2)下培养,均培养20 h后收样。采用Gene Chip Clariom S Array芯片筛选急性低氧诱导和常氧处理细胞的差异表达基因,筛选条件为错误发现率<0.05且|log2FC|>1;用Kolmogorov-Smirnov和KOBAS version 2.0对差异表达基因进行基因本体论功能分析和京都基因与基因组百科全书通路分析。结果与常氧处理的细胞相比,急性低氧诱导的Huh-7细胞中差异表达基因共计392个,其中表达上调基因266个,表达下调基因126个;急性低氧诱导的Hep3B细胞中,差异表达基因共计2 260个,其中表达上调基因847个,表达下调基因1 413个。急性低氧诱导的Huh-7、Hep3B细胞共同的差异表达基因共177个,表达上调基因127个,表达下调基因50个。急性低氧诱导的Huh-7细胞中差异表达基因主要与小分子代谢、有机物生物合成、细胞应激反应相关,主要富集在糖酵解糖异生、MAPK、细胞周期、癌症相关信号通路上。急性低氧诱导的Hep3B细胞中差异表达基因主要与小分子代谢、磷酸化代谢、细胞生长与凋亡等相关,主要富集在细胞周期、神经退行性疾病、细胞凋亡以及磷酸化调控相关信号通路上。两株细胞系共同的差异表达基因表达上调最明显的3个基因TXNIP、ATF3、SLC6A8均与肝癌发生相关。结论成功从急性低氧诱导人肝癌细胞中筛选出差异表达基因,呈高表达的基因可能与肝癌发生相关。
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