pTWIN1-EgAgB8/3自剪切融合蛋白原核表达载体的构建及表达

作者：张瑞妮; 吾拉木·马木提; 于春洋; 法蒂玛·木特力甫

来源：中国人兽共患病学报, 2013, (02): 154-158.

• 棘球绦虫
• EgAgB8/3
• pTWIN1表达载体
• 诱导表达纯化
• western blot Echinococcus granulosus
• EgAgB8/3
• expression vector pTWIN1
• protein purification
• western blot

目的表达获得较纯的细粒棘球绦虫AgB8/3重组抗原(rEgAgB8/3)。方法根据GeneBank登陆号(AF362442)下载目的基因核酸序列,利用DNAman软件设计引物,对EgAgB8/3编码分泌型多肽片段的核酸序列进行PCR扩增,测序鉴定其正确性后定向连入原核表达质粒pTWIN1上,并转化至大肠杆菌ER2566,IPTG诱导表达CBD-intein1-EgAgB8/3融合蛋白后进行纯化,用SDS-PAGE电泳和western blot分析鉴定融合蛋白与目的蛋白rEgAgB8/3的表达量和纯度。结果成功克隆获得EgAgB8/3基因目的片段和具有蛋白自剪切功能的重组表达载体pTWIN1-E...

• 单位
  新疆医科大学