摘要

目的探究健脾养血祛风方对角质形成细胞(KC)的作用及其对紧密连接(tight junctions,TJ)的影响。方法 CCK8检测健脾养血祛风方对人永生化角质形成细胞(HaCat)细胞活力的影响;Western blot检测不同浓度健脾养血祛风方对TJ相关蛋白occludin、claudin-1、JAM-A、Zo-1表达影响情况。ELISA检测IL-4、IL-10、INF-γ、IL-12水平。RT-qPCR检测Toll样受体4(TLR4)、MyD88、NF-κB的mRNA表达水平。结果在不影响细胞活力的前提下,健脾养血祛风方能明显增加occludin、claudin-1、JAM-A、Zo-1蛋白的表达,同时能显著抑制INF-γ、IL-12的释放,促进IL-4、IL-10的生成。此外,健脾养血祛风方还能显著抑制HaCat中TLR4、MyD88、NF-κB水平。结论健脾养血祛风方可调控HaCat中TJ相关蛋白表达,从而修复机械屏障。可能的机制是健脾养血祛风方抑制了TLR4/MyD88/NF-κB信号通路激活,进而改变了炎症因子表达。