弓形虫GJS株表面抗原1基因的原核细胞表达及其抗原性分析

作者：曹丽艳; 张德林; 张燕丽; 芦赟; 蔡志杰; 王艳华; 赵晋军

来源：中国人兽共患病学报, 2009, (08): 804-809.

• 弓形虫
• 表面抗原1
• 克隆表达
• 抗原性分析 Toxoplasma gondii
• the surface antigen1 gene
• cloning
• expression
• antigenicity analysis

目的构建弓形虫GJS株表面抗原1(SAG1)重组表达质粒,研究SAG1蛋白疫苗诱导的保护性免疫作用。方法根据RH株弓形虫SAG1基因序列设计1对引物,利用PCR方法获得SAG1基因,克隆入pMD18-T载体,测序后进行序列分析;重新设计引物将其亚克隆至原核表达载体pET-30a中,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达;重组抗原经纯化和复性后免疫小鼠,ELISA法测定其抗体滴度的变化,并用弓形虫速殖子攻击检测免疫保护力。结果与已知的SAG1基因核苷酸序列(S76248)及其编码氨基酸序列的同源性分别为99%、97%;表达的SAG1蛋白以包涵体形式存在,该重组抗原能被羊抗弓形虫阳性血清所识别;经间接EL...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 甘肃农业大学; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部