摘要
目的:建立小鼠血浆中苯并三唑类紫外线(ultraviolet,UV)吸收剂UV-327和UV-328的高效液相色谱测定方法。方法:在小鼠血浆中加入正己烷-丙酮溶液(体积比1∶1)涡旋混匀提取,上清液于50℃下氮气吹干,残渣用甲醇溶解后离心过滤,采用高效液相色谱-紫外检测器测定小鼠血浆中UV-327和UV-328的浓度。分析柱为Waters Symmetry?C18柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),流动相为100%甲醇,等度洗脱,流速1. 0 mL/min,紫外检测波长为340 nm,以UV-320为内标,保留时间定性,内标法定量。结果:UV-327、UV-328在0. 05~10. 0 mg/L范围内呈现良好的线性关系(r=0. 999 7),检出限为0. 01 mg/L,定量限为0. 03 mg/L。小鼠血浆中,低、中、高3种浓度(0. 50、1. 00、2. 00 mg/L) UV-327和UV-328的平均回收率分别为91. 7%~101. 0%和97. 5%~103. 9%,日内精密度(n=6)分别为2. 9%~6. 6%和2. 7%~7. 4%,日间精密度(n=3)分别为6. 0%~9. 3%和6. 6%~8. 6%,提取回收率分别为98. 8%~103. 8%和99. 8%~100. 9%。血浆样品室温下放置6 h和-40℃放置15 d,UV-327测定值的相对偏差分别为0. 9%~3. 5%和7. 4%~15. 0%,UV-328测定值的相对偏差分别为2. 0%~4. 3%和2. 1%~13. 8%。3种加标浓度的小鼠血浆样品室温下至少可以放置6 h,-40℃冰箱中可以保存15 d。结论:高效液相色谱法简便、快速,准确度、精密度和灵敏度较高,可应用于小鼠血浆中UV-327和UV-328的分析测定。
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单位公共卫生学院; 北京大学