Lnc RNA PCGEM1通过TGF β2/Smad2信号通路调控食管癌细胞侵袭和转移研究

作者：刘勇; 王斌; 金建琴; 陈思思^*

来源：河北医学, 2020, 26(01): 58-63.

• 食管癌
• Lnc RNA PCGEM1
• miR-148a
• TGF β/Smad信号通路

目的:探讨长链非编码RNA PCGEM1(long-chain noncodingRNA PCGEM1,Lnc RNA PCGEM1)通过TGFβ2/Smad2信号通路调控食管癌(esophageal cancer,EC)细胞侵袭和转移。方法:收集62例EC患者癌组织及正常的癌旁组织,qRT-PCR检测Lnc RNAPCGEM1在EC及相应的癌旁组织、不同细胞中的表达情况;构建Lnc RNA PCGEM1沉默细胞系,细胞分为Eca-109-siPCGEM1组、阴性对照Eca-109-siNC组,并以Eca-109作为空白对照组,并构建Eca-109-siPCGEM1细胞的miR-148a沉默细胞系,分为siPCGEM1+simiR-148a组及siPCGEM1+siNC组;平板克隆实验检测Eca-109细胞增殖能力;划痕实验检测Eca-109细胞迁移能力的影响;使用生物信息学网站StarBase预测PCGEM1可互补结合的微小RNA(microRNA,miRNA),再根据Targetscan网站预测相应miRNA可靶向结合的基因;免疫印迹(Western Blot)检测TGFβ2/Smad2信号通路蛋白表达情况。结果:qRT-PCR结果显示,EC组织和食管癌细胞系中Lnc RNA PCGEM1的表达水平高于癌旁组织(P<0.05),与其他细胞株相比, Lnc RNA PCGEM1在Eca-109细胞中表达量最高(P<0.05);与空白对照组相比,Eca-109-siPCGEM1组细胞克隆数和迁移数量明显减少,miR-148a表达量明显增加(P<0.05),空白对照组与Eca-109-siNC组相比差异无统计学意义(P>0.05);与siPCGEM1+NC组相比,siPCGEM1+simiR-148a组细胞克隆数、迁移数量明显增多(P<0.05);StarBase网站预测结果显示,Lnc RNA PCGEM1可与miR-148a互补结合,再经Targetscan网站预测分析显示,miR-148a与TGFβ2存在靶向结合位点;Western blot检测结果显示Eca-109-siPCGEM1组中TGFβ2及Smad 2的表达明显低于空白对照组与Eca-109-siNC组(P<0.05),空白对照组和Eca-109-siNC组中上述指标的表达量无统计学意义(P>0.05)。结论:Lnc RNA PCGEM1在食管癌中高表达,高表达Lnc RNA PCGEM1可能通过下调miR-148a水平,强化TGFβ2/Smad2信号通路,从而促进EC的进展。

• 单位
  十堰市人民医院; 湖北医药学院