流式细胞术检测HLA-B27阴阳性判读标准的建立及灰区样本的基因型分析

作者：吴蓓颖; 顾燕英; 范臻佳; 蔡刚

来源：检验医学, 2020, 35(01): 15-19.

• 人类白细胞抗原-B27
• 流式细胞术
• 强直性脊柱炎
• 流式反向序列特异性寡核苷酸探针

目的建立流式细胞术(FCM)检测人类白细胞抗原(HLA)-B27的阴阳性判读标准,同时探讨灰区样本的特性及应对措施。方法采用FCM检测132例腰背关节痛患者外周血HLA-B27的表达,以流式反向序列特异性寡核苷酸探针(Flow-rSSO)法检测患者HLA-B位点的分型。结果 FCM和Flow-rSSO法检测HLA-B27的阳性率分别为18.18%和73.48%。根据FCMHLA-B27试剂盒推荐的判读规则,灰区样本45例,经Flow-rSSO法验证后,HLA-B27全部为阳性。通过对不同d值(荧光强度的均值与校准磁珠中位值的差值)范围样本的基因型分析设定判读规则,即d>2均判读为阳性,d≤-7为阴性,-7<d≤2为弱阳性(灰区),假阴性率和假阳性率均为0%,灰区样本HLA-B27检出率为80.6%。B27抗原荧光强度与HLA-B27的分型类别无关,而与带有HLA-B27的个数有关,灰区样本通常带有HLA-B7和HLA-B37基因型。结论实验室应拟定自己的HLA-B27阴阳性判断规则,在保证真阳性率的同时,降低假阴性率,并且将灰区范围尽量缩小。灰区样本通常具有特殊的HLA-B型别,可通过Flow-rSSO法来进一步检测,以提高HLA-B27的检出准确度。

• 单位
  上海交通大学医学院附属瑞金医院