碱裂解法快速提取口腔拭子DNA对CHRNA3基因多态性的研究

作者：朱伟锋; 刘卓琦; 吴金兰; 余乐涵; 万福生

来源：重庆医学, 2012, 41(08): 764-765+768+724.

• 多态性
• 限制性片段长度
• 序列分析
• DNA
• 口腔拭子
• 尼古丁乙酰胆碱受体α3
• 碱裂解

目的建立一种快速的从口腔拭子中提取DNA的方法,研究其在尼古丁乙酰胆碱受体α3(CHRNA3)基因多态性分析中的应用。方法以NaOH和乙二胺四乙酸(EDTA)配制碱裂解液,以三羟甲基氨基甲烷-EDTA(TE)为中和液,经加热裂解和中和两步提取口腔拭子DNA。以提取的DNA为模板,用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析对CHRNA3基因的rs6495309进行分型。对不同基因型的样本测序验证。结果 PCR扩增和酶切的靶带清晰,无非特异性条带。酶切结果与测序结果吻合。结论碱裂解法提取口腔拭子DNA具有快速、简便、经济、可靠的特点,可以用于CHRNA3基因多态性的分析。

• 单位
  南昌大学医学院; 南昌大学