摘要
目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA LINC00355)对前列腺癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响及其作用机制。方法:qRT-PCR检测前列腺癌组织及癌旁组织中LINC00355、miR-494-3p、细胞周期蛋白HD2(CCND2)mRNA的表达水平;体外培养前列腺癌细胞DU145,分别将si-NC、si-LINC00355、si-LINC00355与anti-miR-NC、si-LINC00355与anti-miR-494-3p、si-LINC00355与miR-NC、si-LINC00355与miR-494-3p mimics共转染至DU145细胞。MTT检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告实验验证LINC00355与miR-494-3p的靶向调控作用以及miR-494-3p与CCND2的靶向调控作用;Western blot检测CCND2、P21、上皮钙黏附素(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达量。结果:与癌旁组织相比,前列腺癌组织中LINC00355与CCND2 mRNA的表达水平显著升高(P<0.05),miR-494-3p的表达水平显著降低(P<0.05);与si-NC组、si-LINC00355+miR-NC组相比,si-LINC00355组、si-LINC00355+miR-494-3p组细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著减少(P<0.05),P21、E-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),MMP-2蛋白水平显著降低(P<0.05);与si-NC组相比,si-LINC00355组细胞中miR-494-3p的表达水平显著升高(P<0.05),CCND2 mRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与si-LINC00355+anti-miR-NC组相比,si-LINC00355+anti-miR-494-3p组细胞增殖抑制率显著降低(P<0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著增多(P<0.05),P21、E-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05),MMP-2蛋白水平显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实LINC00355能够靶向结合miR-494-3p, miR-494-3p能够靶向CCND2。结论:LINC00355通过与CCND2竞争结合miR-494-3p,降低miR-494-3p对CCND2表达的抑制作用,从而促进前列腺癌细胞增殖、侵袭、迁移。
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单位福建医科大学附属第二医院