阿托伐他汀增加乳腺癌细胞对多柔比星敏感性的研究

作者：杨璐; 杨继鑫; 李南林^*

来源：中华乳腺病杂志(电子版), 2021, 15(01): 30-38.

• 乳腺肿瘤
• 胆固醇
• 多柔比星
• 阿托伐他汀

目的探讨他汀类药物增加乳腺癌细胞对多柔比星敏感性的机制。方法 (1)用不同浓度的多柔比星(0、0.01、0.02、0.04、0.08、0.16、0.32、0.64、1.28μg/ml)与0、2μmol/L的阿托伐他汀联合处理MDA-MB-231细胞,通过细胞计数检测试剂盒(CCK-8)检测450 nm波长下的吸光度值,从而计算细胞活力。(2)分别用0.3μg/ml多柔比星、2μmol/L阿托伐他汀单药及两药联合处理MDA-MB-231细胞,并以未经任何药物处理的细胞作为对照组,通过Hoechst染色检测MDA-MB-231细胞凋亡情况,通过细胞划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力,通过Western blot检测MDA-MB-231细胞中caspase 3、caspase 9、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、甾醇调节元件结合蛋白转录因子2(SREBP2)及低密度脂蛋白受体(LDLR)的表达。细胞活力比较采用析因分析,未凋亡细胞数、划痕面积百分比、穿膜细胞数及不同蛋白表达等指标的多组比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD法。结果 (1)与多柔比星单药相比,阿托伐他汀与多柔比星联合应用可以显著抑制MDA-MB-231细胞活力(F=243.043,P<0.001);不同浓度多柔比星组细胞活力比较,差异有统计学意义(F=1 803.617,P<0.001);两个因素存在交互作用(F=21.030,P<0.001)。(2)各组的未凋亡细胞数比较,差异具有统计学意义(对照组:94.00±4.24:阿托伐他汀组:57.00±1.41,多柔比星组:34.50±2.12,阿托伐他汀+多柔比星组:19.00±2.83,F=261.021,P<0.001),两两比较结果显示,组间差异均有统计学意义(P均<0.050)。各组间的划痕面积百分比比较,差异具有统计学意义[对照组:(28.94±3.59)%,阿托伐他汀组:(31.00±2.99)%,多柔比星组:(40.16±2.38)%,阿托伐他汀+多柔比星组:(60.86±3.60)%,F=42.080,P<0.050]。与对照组、阿托伐他汀组及多柔比星组相比,阿托伐他汀+多柔比星组划痕面积均增加(P均<0.050)。各组穿膜细胞数比较,差异具有统计学意义(对照组:101.20±14.55,阿托伐他汀组:75.80±7.33,多柔比星组:32.40±4.78,阿托伐他汀+多柔比星组:8.80±2.50,F=118.031,P<0.001),两两比较结果显示差异均具有统计学意义(P均<0.050)。各组MDA-MB-231细胞中凋亡相关蛋白caspase 3、caspase 9的表达比较,差异均有统计学意义(F=128.854、247.530,P均<0.001)。与多柔比星组相比,阿托伐他汀+多柔比星组caspase 3、caspase 9蛋白的表达显著增加(P均<0.050)。4组MDA-MB-231细胞中HMGCR、SREBP2、LDLR蛋白的表达量比较,差异均具有统计学意义(F=183.193、227.470、586.087,P均<0.001)。两两比较结果显示,与对照组比较,阿托伐他汀+多柔比星组中HMGCR表达明显升高,SREBP2、LDLR表达明显降低(P均<0.050);与对照组相比,多柔比星组HMGCR的表达无明显改变(P>0.050),SREBP2、LDLR的表达明显降低(P均<0.050),阿托伐他汀组HMGCR表达高于对照组(P<0.050);与多柔比星组相比,阿托伐他汀+多柔比星组HMGCR表达增加(P<0.050),SREBP2的表达降低(P<0.050), LDLR的表达无明显变化(P>0.050)。结论阿托伐他汀通过抑制HMGCR表达,减少细胞内胆固醇的合成,使细胞更依赖于外源性胆固醇的摄取;多柔比星通过抑制LDLR表达减少外源性胆固醇的摄取;因此,当两药联用后由于细胞内胆固醇合成减少,使细胞更依赖于外源性胆固醇的摄取,对多柔比星更加敏感。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学; 西京医院