组织因子siRNA表达载体的构建及其抑制人神经母细胞瘤细胞组织因子表达的研究

作者：方峻; 汤浩; 夏凌辉; 魏文宁; 陈燕; 周木想; 胡豫; 宋善俊

来源：微循环学杂志, 2007, (03): 16-18+80+82.

DOI：10.3969/j.issn.1005-1740.2007.03.005

• 组织因子
• 神经母细胞瘤
• 小干扰RNA

目的:构建组织因子(TF)特异性小干扰RNA(siRNA)表达载体,观察其对人神经母细胞瘤细胞TF表达的影响。方法:分子生物学方法构建TFsiRNA-pSUPER表达载体,限制酶切予以初步筛选,基因测序进行证实。以脂质体Lipo-fectamine2000介导转染人神经母细胞瘤细胞系SK-N-MC。以WesternBlotting检测TF表达。结果:所构建TFsiRNA-pSUPER表达载体经基因测序证实。SK-N-MC细胞高表达TF,TFsiRNA-pSUPER表达载体转染48h后,TF表达水平与转染pSUPER质粒的对照细胞相比显著降低,呈剂量依赖性。结论:人神经母细胞瘤SK-N-MC中TF异常高表达,本研究构建的TFsiRNA表达载体可在SK-N-MC中特异性下调TF表达,可作为干预TF表达、研究其非凝血功能的有效手段。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院