基于脱氧核酶-FRET效应的食品中铅离子快速检测

作者:刘玉梅; 史雅辰; 任尧; 邓锐杰; 赵志峰; 何强
来源:现代食品科技, 2022, 1-8.
DOI:10.13982/j.mfst.1673-9078.2022.5.0857

摘要

为了实现食品中铅(Pb~(2+))污染的快速检测,该研究构建了一种基于Pb~(2+)依赖型脱氧核酶(DNAzyme)及荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET)效应的“Turn on”型铅离子检测传感器。荧光猝灭基团BHQ1可以作为FRET受体猝灭Eva Green的荧光。当Pb~(2+)存在时,底物链的特异性切割反应可以减弱BHQ1对Eva Green的猝灭效果,BHQ1随底物链的断裂而释放,远离供体Eva Green,因此FRET效应减弱,供体Eva Green的荧光得以保留。该研究利用Pb~(2+)诱导的FRET效应的减弱及Eva Green荧光信号的增强可以对铅离子进行定性、定量分析。当脱氧核酶臂长为15 nt-5 nt、Eva Green浓度为1×、底物链与酶链的浓度分别为400 nmol/L与100 nmol/L时,探究了该方法的检出限及线性范围。该反应可在室温条件下3 min内完成,同时对铅离子具有高度的特异性,可以区分不同的金属离子,并且成功应用于新鲜鸡蛋及自来水中的铅离子定量分析,加标回收率为86.79%~113.32%。该研究设计的“Turnon”型铅离子检测传感器可于室温条件下进行一管混反应,无需扩增,反应迅速,为检测食品中的铅污染提供了一些思路。

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