两种酶消化法培养小鼠气道平滑肌细胞的比较

作者：陈凤英; 吴雄灏; 王念; 梁恒瑞; 陈俊邦; 叶润杰; 谢梓泓; 杨伊霖; 赵磊

来源：中华生物医学工程杂志, 2017, 23(02): 122-125.

• 肌细胞,平滑肌
• 细胞培养技术
• 小鼠
• 原代培养
• 气道平滑肌细胞

目的比较两种酶消化法原代培养小鼠气道平滑肌细胞(ASMC)的生长情况。方法取SPF级雄性昆明小鼠10只,处死后分离气管组织,分别采用Ⅰ型胶原酶消化法(单酶消化法)和链霉蛋白酶+Ⅰ型胶原酶消化法(双酶消化法)原代培养ASMC。倒置显微镜下观察细胞形态,免疫荧光鉴定细胞类型。结果单酶消化法培养23 d可见少量细胞贴壁伸展,15 d左右可进行传代。双酶消化法培养23 d可见较多细胞贴壁伸展,79 d可进行传代。免疫荧光检测显示,胞质中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)呈红色阳性反应,两种方法所培养的细胞95%以上为ASMC。结论两种方法均可获得高纯度的ASMC,在细胞质量方面无明显差异。单酶消化法操作简便,但细胞培养周期较长,双酶消化法细胞生长较快但操作相对复杂。

• 单位
  广州医科大学; 第一临床学院