摘要

目的 检测丙泊酚对大鼠海马及其星形胶质细胞脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor, BDNF)表达分泌的影响,并探讨其中涉及的信号分子。方法 按随机数字表法将24只SD大鼠分为3组(每组8只),根据丙泊酚给予后不同时间检测点分别命名为:注射丙泊酚后即刻检测组(0 min组)、注射丙泊酚后45 min检测组(45 min组)、注射丙泊酚后90 min检测组(90 min组)。将丙泊酚注射液(10 g/L)以100 mg/kg腹腔注射后,用定量PCR检测大鼠海马BDNF的mRNA水平,用免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)表达。体外实验中培养的细胞分为3组:对照组(Ctrl组)、丙泊酚组(Pro组)和抑制剂PD98059+丙泊酚组(Pro-PD组)。Pro-PD组先用10 μmol/L细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)抑制剂PD98059预处理培养的原代大鼠海马星形胶质细胞2 h,随后用10 μmol/L丙泊酚继续孵育24 h。检测各组细胞凋亡及BDNF分泌情况。结果 与0 min组比较,45 min组、90 min组大鼠海马BDNF mRNA水平分别为1.20±0.05和0.86±0.04(P<0.05),且BDNF mRNA水平均呈时间依赖性变化,先增高,而后降低。免疫组织化学法检测显示45 min组GFAP表达升高。体外实验显示,Ctrl组细胞存活率为(91.2±2.4)%,Pro组细胞存活率为(90.3±3.0)%,两组差异无统计学意义(P>0.05)。与Ctrl组比较,Pro组海马星形胶质细胞的BDNF mRNA水平为1.15±0.04(P<0.05),而Pro-PD组细胞BDNF的mRNA水平为0.92±0.05(P>0.05),且显著低于Pro组(P<0.05)。Pro组海马星形胶质细胞BDNF的分泌水平为(62±4)ng/L,高于Ctrl组(49±3)ng/L(P<0.05);而Pro-PD组细胞BDNF的浓度为(44±3)ng/L,与Ctrl组差异无统计学意义(P>0.05),但显著低于Pro组(P<0.05)。结论 丙泊酚激活海马星形胶质细胞,并通过ERK信号通路提高海马星形胶质细胞BDNF的表达和分泌。

  • 单位
    上海交通大学医学院附属仁济医院

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