摘要
目的:观察电针对完全弗氏佐剂(CFA)诱导的慢性炎性痛小鼠足掌局部炎性介质,巨噬细胞极化及脾脏中相关免疫细胞的影响,探究电针缓解慢性炎性痛小鼠疼痛肿胀的免疫炎性调控机制。方法:C57/BL6小鼠随机分为对照组、模型组、电针组,每组10只。连续7 d左后肢足掌皮下注射20 μL CFA溶液建立慢性炎性痛小鼠模型。造模后电针组给予双侧“足三里”电针治疗20 min(2 Hz/100 Hz,1 mA),每天1次,连续18 d。造模前后、干预前后(第0、1、3、5、10、15、20、25天)分别测量各组大鼠机械痛阈值、热甩尾时间和足掌厚度,Western blot法检测足掌组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)表达,免疫组织化学法检测足掌局部巨噬细胞M1型标记物iNOS、M2型标记物CD206的阳性表达,流式细胞术检测脾脏F4/80+CD11b+巨噬细胞、Ly6G+CD11b+中性粒细胞、CD25+Foxp3+辅助性T细胞(Treg)占比。结果:与对照组相比,模型组大鼠机械痛、热甩尾时间明显降低(P<0.000 1),左后肢足掌厚度,足掌局部IL-1β、TNF-α、NLRP3表达量,足掌局部M1巨噬细胞标记物iNOS阳性表达,脾脏组织中巨噬细胞、中性粒细胞占比明显升高(P<0.000 1,P<0.001)。与模型组相比,电针组小鼠治疗后(实验第10、15、20、25天)机械痛阈值、热甩尾时间,CD206阳性表达量,Treg占比显著升高(P<0.01,P<0.001,P<0.05),治疗后(实验第15、20、25天)足掌厚度,足掌局部IL-1β、TNF-α、NLRP3蛋白的表达,足掌局部iNOS阳性表达量,脾脏组织中巨噬细胞、中性粒细胞占比显著降低(P<0.001,P<0.000 1,P<0.01,P<0.1)。结论:电针可能通过调控巨噬细胞、中性粒细胞、Treg数量,并促进局部巨噬细胞向M2型极化,抑制促炎因子释放,从而缓解慢性炎性痛小鼠的疼痛及肿胀。
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