以β-淀粉样蛋白为靶的单价及二价真核表达载体的构建和表达

作者：王烈峰; 汪华侨; 张革; 邹俊涛; 谢瑶; 袁群芳; 姚志彬

来源：中山大学学报(医学科学版), 2006, 27(03): 250-253+317.

DOI：10.3321/j.issn:1672-3554.2006.03.003

• 老年性痴呆
• β-淀粉样蛋白
• Tg2576转基因鼠
• 重组质粒
• 真核表达载体

目的构建以β-淀粉样蛋白为靶单价及二价真核表达载体pcDNA3.1-Aβ1-42、pcDNA3.1-Aβ42×2,并在真核细胞中表达目的蛋白。方法PCR法扩增编码β-淀粉样蛋白的目的基因,利用基因克隆技术构建单价及二价真核表达载体;应用酶切及测序鉴定真核表达载体构建成功后,用Westernblot和细胞免疫组化染色检测其在真核细胞中的表达。结果相应的双酶酶切能够获得插入的目的基因片段(分别为137bp和269bp),测序未发现突变;Westernblot结果可见两条约为4ku和8ku的条带,细胞免疫组化染色可见阳性细胞。结论单价及二价真核表达载体构建成功;真核表达载体能在真核细胞中表达出目的蛋白。

• 单位
  中山大学; 解剖学教研室; 基础医学院