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摘要
本文旨在探讨外泌体对鱼藤酮诱导的帕金森细胞损伤模型的保护作用及机制。以新鲜生牛乳为原料，采用超高速离心法制备外泌体并用动态光散射仪、透射电镜和蛋白质免疫印迹法进行表征，分别观测其粒径大小、形态和标志蛋白CD63和CD9。本研究构建了鱼藤酮诱导的SHSY5Y细胞帕金森损伤模型，通过细胞形态及活力变化确定最佳造模浓度。采用MTT法测定对照组、模型组和外泌体给药组细胞活力，倒置显微镜观测细胞形态变化。采用JC-1染色观察线粒体膜电位的变化，流式细胞术检测细胞凋亡率。外泌体表征的结果表明，制备的外泌体粒径大小主要分布在40～100 nm范围内，含有其标志性蛋白CD63及CD9。鱼藤酮诱导的SHSY5Y细胞帕金森损伤模型结果表明，0.20～2.00μmol/L鱼藤酮可诱导SHSY5Y细胞损伤，1.00μmol/L鱼藤酮处理24 h后的细胞形态和细胞存活率变化明显且适度。外泌体给药组细胞活力为80.34%，明显高于模型组的59.77%(P<0.01)，且外泌体给药组能明显改善细胞形态。JC-1染色结果表明，外泌体给药组能显著缓解线粒体膜电位下降(P<0.01)；外泌体给药组凋亡率为15.01%，与模型组的32.60%相比，明显抑制了细胞凋亡(P<0.01)。因此，结果表明，外泌体对鱼藤酮诱导的帕金森细胞损伤具有明显的保护作用，这种保护可能是通过抑制细胞凋亡来进行的。
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