微小RNA-10b沉默对人三阴性乳腺癌细胞生物学行为的影响及其机制

作者：田南南; 孙国栋; 郑名华; 杨建新

来源：中华实验外科杂志, 2014, 31(05): 932-934.

• 三阴性乳腺癌
• 微小RNA-10b
• T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1
• 侵袭

目的观察微小RNA-10b(miR-10b)沉默对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学行为的影响,并探讨其机制。方法用人工合成的miR-10b inhibitor转染MDA-MB-231细胞,同时设空白细胞组和无义序列转染组为对照组,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染后miR-10b的表达,以检验沉默效果。CCK-8法、流式细胞术、Transwell侵袭实验分析细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力变化。Real-time PCR和Western blot法分别检测T淋巴细胞侵袭转移诱导因子1(TIAM1)mRNA和蛋白的表达。结果与对照组比较,miR-10b inhibitor转染组的2-△△Ct值(0.26±0.01)明显下调(P<0.01),表明成功沉默miR-10b的表达。miR-10b沉默后,48 h和72 h细胞增殖率分别为(409.10±8.38)%和(610.70±17.59)%,均明显上调(P<0.01),增殖效应在48 h之后出现,并一直维持到72 h;早期和晚期细胞凋亡比例分别为1.77%和1.61%,均明显下调(P<0.05);穿过基质膜的侵袭和迁移细胞数分别为(212.17±13.57)个和(322.67±8.62)个,均明显上调(P<0.01)。TIAM1基因在mRNA水平变化不大(P>0.05),在蛋白水平表达上调(P<0.05)。结论miR-10b沉默可以促进MDA-MB-231细胞的增殖、侵袭和迁移,并抑制凋亡,其机制可能与miR-10b沉默后在转录后水平上调TIAM1蛋白的表达有关。

• 单位
  广东药学院