摘要
通过设计和筛选引物、探针组合,优化实时荧光定量PCR(qPCR)反应体系,建立了绿豆源性成分qPCR鉴定方法,并对其准确性进行了验证。结果表明,筛选出的引物、探针组合特异性良好,通过对其反应终浓度和退火温度的优化,获得了最优的qPCR反应条件,扩增效率可达100.3%。确定了绿豆源性成分的检出限为0.05%,定量限为0.1%。在实际应用中,模拟样品、市售样品的定量值标准差和相对标准偏差均小于25%。由此可知,建立的实时荧光定量PCR方法能够特异性鉴定食品中的绿豆源性成分,并对其进行定量,准确度较高。
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单位天津农学院; 天津市农业科学院