摘要
目的 通过观察化瘀通络灸对血管性痴呆(Vascular dementia, VD)大鼠学习记忆能力及海马区旁分泌基质细胞衍生因子1(Stromal cell-derived factor-1,SDF-1)/趋化因子受体4(C-X-C chemokine receptor type4,CXCR4)表达的影响,探明化瘀通络灸调控“Neurovascular Niche”(神经血管小生境)过程在治疗VD中的作用机制。方法 成年雄性Wistar大鼠,双侧颈总动脉永久性结扎复制VD大鼠模型,体外培养、鉴定神经干细胞(NSCs)、内皮祖细胞(EPCs);采用增强的绿色荧光蛋白(EGFP)标记NSCs,并与EPCs共培养构建EPCs+NSCs共植体,移植到VD大鼠侧脑室,模拟脑内神经血管小生境;实验一:将造模成功的VD大鼠分为模型组、EPCs+NSCs艾灸组、EPCs+NSCs空白组,每组各12只。EPCs+NSCs艾灸组以化瘀通络灸法干预,EPCs+NSCs空白组及模型组不作其他任何处理。各组大鼠于治疗前和治疗3个疗程后,Morris水迷宫试验测试学习记忆成绩;实验二:将造模成功的VD大鼠分为模型组、EPCs+NSCs艾灸组、EPCs+NSCs空白组,每组各18只。每组在根据1、2、3疗程不同分成3个亚组,每亚组各6只。免疫荧光法检测各组VD大鼠在治疗第1、2、3疗程后不同时间节点,海马区信号蛋白SDF-1/CXCR4的表达情况,分别进行治疗前后和组间比较。结果 治疗3个疗程结束后,EPCs+NSCs艾灸组大鼠在缩短逃避潜伏期、降低第一次穿越平台时间、增加穿越平台次数均优于模型组、EPCs+NSCs空白组,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);EPCs+NSCs艾灸组蛋白表达增加优于EPCs+NSCs空白组,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05),且EPCs+NSCs艾灸组3个疗程之间蛋白表达存在逐步增加的趋势。结论 化瘀通络灸可有效提高VD大鼠的学习记忆能力,促进外源性NSCs增殖、分化、成熟,形成新生神经元,上调EPCs+NSCs共植体大鼠海马区SDF-1/CXCR4蛋白的表达,修复损伤的神经细胞,改善脑损伤。
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单位安徽中医药大学第一附属医院; 安徽中医药大学; 省中西医结合医院