干扰素α对口腔鳞状细胞癌细胞JAK-信号转导子和转录激活子-细胞因子信号抑制因子信号通路基因表达的影响

作者：游锦梅; 许雅鑫; 吴彬; Yang Yong; 李钰; 陈显久

来源：肿瘤研究与临床, 2015, 27(05): 320-327+331.

• 干扰素
• 口腔鳞状细胞癌
• 酪氨酸蛋白激酶
• 信号转导通路

目的以3种不同癌变程度的口腔细胞为工具,观察在干扰素α(IFN-α)作用下,JAK-信号转导子和转录激活子(STAT)-细胞因子信号抑制因子(SOCS)信号分子的表达变化,为深入理解口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞免疫逃逸的机制提供研究基础。方法常规培养NOK、DOK、KB细胞。空白组加入完全培养液,二甲基亚砜(DMSO)对照组加入含有0.1%DMSO的完全培养液,实验组设10、100、500U/ml三个不同浓度组,每孔分别加入含不同浓度IFN-α的完全培养液,JAK抑制剂干预组在加入IFN-α前1 h加入JAK抑制剂CP-690550 100μmol/L。细胞培养24h后检测。进行反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot实验。结果采用RT-PCR法检测显示:JAK1和JAK2在NOK细胞均有少量表达,IFN-α和CP-690550对NOK细胞组的JAK1和JAK2表达无影响,差异无统计学意义(P>0.05)。100和500 U/ml的IFN-α能刺激DOK和KB细胞的JAK1和JAK2表达增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。CP-690550能有效减低DOK和KB细胞的JAK1表达,差异均具有统计学意义(P<0.05),而对JAK2表达无作用。采用Western blot法检测显示:STAT1、STAT3和pSTAT3(Tyr705)在对照组均有表达,pSTAT1(Tyr701)在对照组无表达;IFN-α和CP-690550对NOK细胞组的STAT1、STAT3和pSTAT3(Tyr705)表达无影响,差异无统计学意义(P>0.05)。100、500 U/ml的IFN-α能刺激DOK和KB细胞的pSTAT3(Tyr705)表达增加,差异均具有统计学意义(P<0.05);而对pSTAT1(Tyr701)的表达无影响。CP-690550能有效减低DOK和KB细胞的pSTAT3(Tyr705)表达,差异均具有统计学意义(P<0.05)。采用Western blot法检测显示,SOCS1和SOCS3在对照组均有表达;IFN-α和CP-690550对NOK细胞组的SOCS1和SOCS3表达无影响,差异无统计学意义(P>0.05)。100 U/ml和500 U/ml的IFN-α能刺激DOK和KB细胞的SOCS1表达增加,差异均具有统计学意义(P<0.05);而对SOCS3的表达无影响。CP-690550能有效减低DOK和KB细胞的SOCS1表达,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 IFN-α激活DOK和KB细胞JAK1和JAK2的表达,以JAK1激活为主;IFN-α通过激活DOK和KB细胞JAK1和JAK2的表达促进STAT3在Tyr705位点磷酸化;IFN-α通过促进STAT3磷酸化进一步促进SOCS1的表达,发挥对IFN-α作用的抑制作用,减少细胞凋亡。

• 单位
  山西医科大学; 太原钢铁(集团)有限公司总医院; 中心实验室; 山西医科大学第一医院; 太原钢铁(集团）有限公司总医院