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摘要
黄嘌呤脱氢酶广泛分布在真核生物、细菌和古细菌中,是催化氧化嘌呤、蝶啶和醛类等多种杂环分子的氧化还原酶类,与氮同化、激素代谢、衰老的调控及活性氧产生等过程相关。耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans R1)具有超强的氧化胁迫抗性和氧保护机制,其基因组含有完整的黄嘌呤脱氢酶编码基因xdhABC。为探究该酶的功能,构建了xdhA缺失突变株,通过比较分析突变株ΔxdhA与野生型菌株对嘌呤代谢及甲醛敏感性,确定xdhABC编码蛋白为黄嘌呤脱氢酶。氧化胁迫(60 mmol·L-1 H2O2)条件下,菌株生存率以及氧保护相关基因表达的差异分析结果表明,ΔxdhA生存能力较野生型低2个数量级;氧化胁迫反应相关基因表达下调。另外,酶活分析也表明,H2O2冲击条件下xdhA突变导致细胞内总抗氧化能力下降。推测D.radiodurans R1黄嘌呤脱氢酶在氧化胁迫反应中发挥重要作用。
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