摘要
目的探讨田蓟苷对人肝癌细胞株(HepG2)胆固醇代谢的作用机制。方法用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导HepG2细胞脂质堆积模型。用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞活力,根据细胞活力选取田蓟苷100μmol·L~(-1)浓度(田蓟苷-2组)进行后续实验。将HepG2细胞分为4组:对照组(溶剂)、模型组(ox-LDL 50 mg·L~(-1))、田蓟苷-2组(模型组+田蓟苷100μmol·L~(-1))和联合组[田蓟苷-2组+磷脂酰肌醇激酶(PI3K)抑制剂(LY294002)10μmol·L~(-1)]。通过酶联免疫吸附法检测HepG2细胞内胆固醇水平,油红O染色法观察细胞内脂滴堆积情况(光密度值),实时荧光定量聚合酶链式反应和蛋白质印迹法检测相关基因和蛋白的表达水平。结果对照组、模型组、田蓟苷-2组和联合组的胆固醇含量分别为(30.87±4.75),(121.79±17.63),(57.05±8.01)和(117.92±14.32)mmol·L~(-1);脂质含量分别为1.68±0.20,5.33±0.75,2.04±0.20和4.71±0.65;磷酸化(p)-PI3K蛋白表达水平分别为1.02±0.09,0.54±0.10,0.92±0.09和0.57±0.09;p-Akt蛋白表达水平分别为1.03±0.09,0.55±0.09,0.94±0.07和0.60±0.09;SREBP-2蛋白表达水平分别为1.02±0.08,2.10±0.31,1.28±0.16和1.90±0.18。基因结果的趋势与蛋白一致。上述指标:模型组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);田蓟苷-2组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);联合组与田蓟苷-2组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论田蓟苷可能通过PI3K/Akt信号通路抑制SREBP-2激活,参与了肝内胆固醇的调节作用。
-
单位新疆维吾尔自治区药物研究所; 新疆医科大学第六附属医院