基于单个B细胞抗O型口蹄疫病毒单克隆抗体的研制

作者：张雨; 秦晓东; 朱学亮; 殷相平; 李彦敏; 张志东^*

来源：中国兽医科学, 2019, 49(09): 1082-1089.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0141

• 单个B细胞
• 口蹄疫病毒
• 抗体
• 流式分选技术
• 单细胞巢式PCR

为了建立基于单个B细胞制备抗体技术,本研究以O型灭活FMDV为抗原,采集健康C57/BL小鼠脾细胞,经过磁珠富集、流式B220+/CD38+/Ig G1+/抗原+分选,获得单个抗原特异性的B细胞。经单细胞巢式PCR反应扩增获得抗体完整轻、重链可变区序列后,分别构建轻/重链表达质粒,然后共转染HEK-293细胞后,成功获得3株特异性单克隆抗体,且证明均属于Ig G1型抗体;ELISA结果显示,获得的3株抗体均能与O型FMDV抗原结合;免疫荧光试验证明,3株抗体能够特异性结合细胞内复制的O型FMDV。本研究成功建立了基于单个B细胞直接制备抗FMDV单抗的方法,为后期开发特异性单克隆抗体打下了坚实的基础。

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所